Nghiên cứu chế tạo kít LAMP chẩn đoán sán lá gan nhỏ Clonorchis sinensis nhiễm trên người

Tóm tắt

Đặt vấn đề: Clonorchis sinensis là một trong ba loài sán lá gan nhỏ gây bệnh trên người, lưu hành chủ yếu ở châu Á và miền Bắc Việt Nam. LAMP (Loop-mediated isothermal amplification) có độ nhạy, đặc hiệu tương đương với PCR nhưng yêu cầu về trang thiết bị xét nghiệm đơn giản hơn so với PCR. Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu thực nghiệm chế tạo kít LAMP chẩn đoán C. sinensis, đánh giá kít LAMP tại phòng thí nghiệm và thực địa hẹp với 150 mẫu phân thu thập từ người dân sống trong vùng dịch tễ sán lá gan nhỏ. Kết quả: Thiết kế, lựa chọn bộ mồi LAMP, tối ưu điều kiện và thành phần của phản ứng LAMP chẩn đoán C. sinensis. Kết quả đánh giá kít LAMP tại phòng thí nghiệm cho độ nhạy là 98,63% (95% CI: 91,92-99,99%), độ đặc hiệu 100% (95% CI: 85,25-100%), ngưỡng giới hạn phát hiện tối thiểu 26 bản sao gen/µl, độ ổn định là 12 tháng (bảo quản -20±5^oC) và 6 tháng kể từ ngày mở nắp. Đánh giá kít LAMP tại tỉnh Ninh Bình phát hiện tỷ lệ nhiễm C. sinensis là 6,66%, tương đồng với xét nghiệm bằng real-time PCR. Kết luận: Chế tạo được kít LAMP chẩn đoán C. sinensis có độ nhạy, độ đặc hiệu cao >95%, độ ổn định của kít là 12 tháng trong điều kiện bảo quản -20±5^oC và 6 tháng kể từ ngày mở nắp sản phẩm.