Khảo sát hoạt tính enzyme tyrosinase ngoại bào của vi khuẩn Ralstonia solanacearum và sàng lọc khả năng ức chế enzyme của một số dịch chiết thực vật

Tóm tắt

Enzyme tyrosinase ngoại bào của vi khuẩn Ralstonia solanacearum được tinh sạch một phần bằng kết tủa phân đoạn ammonium sulfate kết hợp với màng Amicon để cô đặc loại muối và các phân tử <10 kDa. Ở phân đoạn ammonium sulfate 80% bão hoà, enzyme tyrosinase của R. solanacearum biểu hiện hoạt tính mạnh nhất với hoạt tính monophenolase và diphenolase khi oxy hoá 2 cơ chất L-tyrosine và L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA). So với enzyme tyrosinase của nấm mỡ Agaricus bisporus, hoạt độ và tốc độ V_max của enzyme này từ R. solanacearum đạt tương ứng 89,5 và 86,7%. Giá trị IC₅₀ của axit kojic với tyrosinase của A. bisporus trong phản ứng với L-tyrosine và L-DOPA tương ứng là 0,0139 và 0,0128 mM và của R. solanacearum tương ứng là 0,0181 và 0,0191 mM. Zerumbone từ gừng gió và các phân đoạn flavonoid từ lá mít, hoa hoè và đại kế đều ức chế hoạt tính của cả 2 enzyme. Phân đoạn flavonoid từ lá mít cho hiệu quả ức chế enzyme cao hơn so với phân đoạn flavonoid từ hoa hoè và đại kế. So với axit kojic, phân đoạn flavonoid từ lá mít có hiệu quả ức chế bằng 81,76% ở ngưỡng nồng độ 0,1 mg/ml, (p<0,05). Kết quả nghiên cứu ban đầu cho thấy, enzyme tyrosinase ngoại bào của vi khuẩn R. solanacearum có thể ứng dụng để sàng lọc các hợp chất tự nhiên có khả năng ức chế enzyme tyrosinase.