Phát triển và thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao để định lượng nystatin trong hệ tiểu phân nano lipid

Tóm tắt

Nghiên cứu này nhằm thiết lập và thẩm định một quy trình định lượng nystatin (NYS) chính xác trong hệ thống chất mang lipid cấu trúc nano (NLC), khắc phục hạn chế về độ tan và tính thấm thấp của hoạt chất nhóm BCS IV (Biopharmaceutics Classification System Class IV). Phương pháp: Quá trình phân tích được thực hiện trên hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC - High Performance Liquid Chromatograph) Waters e2695 với cột C18 (250x4,6 mm, 5 µm). Pha động tối ưu bao gồm: methanol - acetonitril - đệm amoni acetat 0,05 M (55:15:30, tt/tt/tt) với tốc độ dòng 1 ml/phút, phát hiện tại bước sóng 305 nm. Quy trình xử lý mẫu sử dụng DMSO 5% làm dung môi trung gian để phá vỡ cấu trúc lipid. Kết quả: Phương pháp đạt tính tương thích hệ thống cao với RSD (Relative Standard Deviation) của thời gian lưu và diện tích pic <2%. Tính tuyến tính được thiết lập trong khoảng 20-200 IU/ml với hệ số tương quan R2=0,9996. Giới hạn định lượng và phát hiện cho thấy độ nhạy cao. Độ đúng của phương pháp đạt tỷ lệ thu hồi từ 98,18 đến 101,38%. Độ lặp lại và độ chính xác trung gian đều đạt yêu cầu với RSD<2,0%. Đặc biệt, phương pháp chứng minh tính đặc hiệu tuyệt đối, không chịu ảnh hưởng bởi nền mẫu lipid phức tạp. Kết luận: Quy trình HPLC được xây dựng đơn giản, tin cậy và chính xác, phù hợp để kiểm soát chất lượng và đánh giá hiệu suất tải thuốc của các hệ tiểu phân nano lipid chứa nystatin.