Phát triển phương pháp HPLC-DAD định lượng pentostatin trong quả thể nấm dược liệu Cordyceps militaris

Tóm tắt

Cordyceps militaris là loài nấm dược liệu quan trọng trong y học cổ truyền. Chúng chứa nhiều hoạt chất có hoạt tính sinh học ứng dụng trong y học như cordycepin, adenosine… Gần đây thông qua phân tích hệ gen, C. militaris đã được chứng minh có khả năng sinh tổng hợp pentostatin. Pentostatin là hoạt chất quan trọng trong sản xuất các loại thuốc hóa trị sử dụng trong điều trị ung thư. Tuy nhiên, việc phát triển các phương pháp định lượng pentostatin trong nấm C. militaris chưa có nhiều nghiên cứu đề cập. Trong nghiên cứu này, các tác giả xây dựng và thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC-DAD) đơn giản với độ chính xác cao để định lượng pentostatin trong quả thể nấm C. militaris. Quá trình sắc ký được thực hiện trên cột C₁₈
của Hãng Agilent (250x4,6 mm, 5 µm) với chương trình rửa giải gradient sử dụng hệ dung môi pha động gồm acetonitrile và nước. Tốc độ rửa giải là 0,6 ml/phút, bước sóng phát hiện được lựa chọn là 280 nm. Đường chuẩn xây dựng được đều đạt độ tuyến tính cao với R²>0,99. Kết quả thẩm định phương pháp về độ lặp lại, hiệu suất thu hồi, độ chọn lọc đều đạt theo hướng dẫn của Hội nghị quốc tế về hài hòa các thủ tục đăng ký
dược phẩm sử dụng cho con người (International Conference on Harmonization).